荧光滤光片在荧光显微镜的用途

2021-03-18 10:36:49 @CJ-NMOT 63

我们都知道荧光显微镜是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。

荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

为了让荧光显微镜能够更好的检测,需要在荧光显微镜里安装三种滤光片分别是:

        (a)激发滤光片;

        (b)发射滤光片;

        (c)二色分束镜;

激发滤光片和发射滤光片是一种带通滤光片,它传输对应于相应荧光团吸收或发射光谱的波长范围,同时阻挡任何一侧的外来光。如果希望图像亮度高于对比度,则发射滤光片也可以是长波通滤光片,它不是阻塞而是传输更长的波长。大多数二色分光镜是设计用于45°入射角(AOI)。二向色滤光片将滤过的激发光导向样品,并将样品的发射光束通过发射滤光片导向CCD检测器。

荧光滤光片组可以是单波段或多波段,并且可以存在于多种配置中,最常见的是荧光滤光片立方体和滤光片轮。单波段滤光片组可用于查看标记有多个荧光团的样本,方法是使用每个相应的滤光片立方体拍摄一系列图像,然后创建最终的合成图像。这也可以通过使用Pinkel滤光片或Sedat滤光片轮配置来实现。Pinkel滤光片组由多波段发射滤光片和多向滤光片组成,它们与多个单波段激发滤光片一起使用。Sedat滤光片组包含一个多向滤光片,该滤光片单独与多个单波段激发滤光片和发射滤光片一起使用。全多波段滤光片组由多波段激发滤光片、多波段发射滤光片和多向滤光片组成,可生成包含所有荧光标记的单个图像。

滤光片

纳宏光电可以为您提供的几种荧光滤光片类型:

1. 长波通滤光片套装

2. 短波通滤光片套装

3. 单带通滤光片套装:

常用的滤光片适用于有DAPI, FITC, Texas Red, TRITC, CFP, YFP, GFP, Cy3.5, Cy5.5;FISH滤光片: FISH Aqua, FISH Red, FISH Orange, FISH Green。

4. 多带通滤光片套装:DAPI-FITC, DAPI-Texas Red, FITC-Texas Red。

5. 三带通滤光片:DAPI-FITC-Texas, DAPI-FITC-TRITC。

6. 单片滤光片 (激发滤光片、发射滤光片、二向色镜)

通道荧光探针EX激发滤光片波长(nm)EM发射滤光片波长(nm)DM二向色镜(nm)
绿色FAM492518505
FITC(Fluorescein)495519507
Alexa Fluor 488499520510
黄色JOE520548534
VIC538554546
HEX533559546
TET521542532
CAL Flour Orange 560538559549
橙/红ROX578604591
Cy3554566560
Cy 3.5578591585
Alexa Flour 568578603591
深红Cy5649666658
Quasar 670647670569
Alexa Flour 633632647640
Cy5.5672690681
Cy7753775764
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